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产品概述
product description
贝博® 细胞内囊泡（Vesicles）提取试剂盒适用于从各种原代或传代培养细胞样品中提取高纯度总囊泡。不需要超速离心，仅需通过简单的常规离心即可从样本中获取大量结构完整的囊泡，具有快速简单，提取效率高的特点，可节省更多的实验时间和样本。提取的囊泡可根据实验目的用于后续的多种实验，应用范围广泛。
本试剂盒可以提取所有直径为10 nm - 3000 nm的囊泡结构。
贝博® 生物自主开发的囊泡快速提取试剂盒系列产品，可以通过简单离心快速高效获得高纯度囊泡颗粒。本试剂盒提取的囊泡完好无缺，能用于各种功能研究、蛋白分析及RNA分析、电镜分析、NTA粒径分析等下游实验应用。
贝贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
保存温度
2-8℃
注意事项
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
有效期
一年
适用样本
细胞
产品特点
1. 使用方便，无需超速离心，省时省力；
2. 纯度高，富集量大，应用范围广；
3. 获取的囊泡结构和功能完整；
4. 稳定性好，便于运输，便于保存。
2. 纯度高，富集量大，应用范围广；
3. 获取的囊泡结构和功能完整；
4. 稳定性好，便于运输，便于保存。
仪器准备
1. 离心机
2. 移液器
3. 冰箱
冰盒
2. 移液器
3. 冰箱
冰盒
试剂准备
1. PBS缓冲液 或者HBSS2. 纯水
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
2. 吸头
3. 一次性手套
使用注意事项
1. 不同细胞的囊泡数量差异极大，请根据实际情况选择样品的量，根据下游应用和参考文献确定。条件允许的情况下采用尽可能多的细胞。
2. 在收获细胞时，应确定死亡细胞不超过5%。细胞凋亡/死亡过程中会释放大量大小不等的囊泡，它们在囊泡的提取过程中会污染活细胞产生的囊泡。
3. 已经分离好的囊泡样本如果需要进行电镜观察，只能冰上或4℃保存，存放时间不超过两天，注意不可冷冻保存，否则可能会影响电镜观察效果。
2. 在收获细胞时，应确定死亡细胞不超过5%。细胞凋亡/死亡过程中会释放大量大小不等的囊泡，它们在囊泡的提取过程中会污染活细胞产生的囊泡。
3. 已经分离好的囊泡样本如果需要进行电镜观察，只能冰上或4℃保存，存放时间不超过两天，注意不可冷冻保存，否则可能会影响电镜观察效果。
使用方法
1. 取5-10×106个细胞，在4℃，500×g力条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 细胞沉淀中加入1 ml试剂D，充分混匀（每20 μl体积细胞沉淀（约20 mg，2×106个细胞）中加入200-300 μl冷的提取液 D），高速涡旋振荡混匀或吹打混匀，置2-8℃条件振荡10-30分钟。
4. 然后在4℃，2000×g条件下离心5分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管。
6. 在1 ml上清中加入0.25 ml提取液A，盖紧离心管盖，上下颠倒混匀1分钟左右，使液体充分混匀。
7. 置2-8℃冰箱静置过夜。
8. 在4℃条件下，10000×g离心60分钟。
9. 小心移除上清，收集沉淀。
10. 取50-100 μl囊泡保存液将沉淀重悬，用移液器轻轻吹打混匀，得到囊泡沉淀重悬液，进行下列囊泡纯化步骤操作。
11. 将囊泡样本-80℃保存或直接用于下游应用。
2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 细胞沉淀中加入1 ml试剂D，充分混匀（每20 μl体积细胞沉淀（约20 mg，2×106个细胞）中加入200-300 μl冷的提取液 D），高速涡旋振荡混匀或吹打混匀，置2-8℃条件振荡10-30分钟。
4. 然后在4℃，2000×g条件下离心5分钟。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管。
6. 在1 ml上清中加入0.25 ml提取液A，盖紧离心管盖，上下颠倒混匀1分钟左右，使液体充分混匀。
7. 置2-8℃冰箱静置过夜。
8. 在4℃条件下，10000×g离心60分钟。
9. 小心移除上清，收集沉淀。
10. 取50-100 μl囊泡保存液将沉淀重悬，用移液器轻轻吹打混匀，得到囊泡沉淀重悬液，进行下列囊泡纯化步骤操作。
11. 将囊泡样本-80℃保存或直接用于下游应用。
常见问题分析
1. 蛋白浓度低？
很多细胞囊泡量不够下游应用，在条件允许的情况请尽可能加大培养上清的上样量。
处理部分样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。请选择高质量的蛋白裂解液或蛋白提取试剂盒。
2. 抽提得到的RNA浓度低？
很多细胞囊泡量不够下游应用，在条件允许的情况请尽可能加大培养上清的上样量。
很多细胞囊泡量不够下游应用，在条件允许的情况请尽可能加大培养上清的上样量。
处理部分样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。请选择高质量的蛋白裂解液或蛋白提取试剂盒。
2. 抽提得到的RNA浓度低？
很多细胞囊泡量不够下游应用，在条件允许的情况请尽可能加大培养上清的上样量。
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